Generación de una colección de líneas celulares Cas9+ para estudios de edición genómica mediante CRISPR/Cas9

Abstract

[spa] La edición genómica basada en el sistema CRISPR/Cas9 se ha convertido en una herramienta central para estudios de la función génica en modelos celulares. Consecuentemente, resulta también de gran interés utilizar esta metodología para el estudio de la función génica en células de gliomas malignos. Para conseguir una edición genómica eficiente, cabe disponer de células con elevados niveles de expresión de la endonucleasa bacteriana Cas9, lo que implica en la práctica seleccionar transfectantes de Cas9. Una vez se dispone de células Cas9+, estas se pueden someter a transfección con sgRNAs específicos para los genes de interés con el objetivo de modular su expresión. El objetivo general de este trabajo es generar una colección de líneas celulares de glioblastoma humanas Cas9+ para su futura utilización en estudios de edición genómica mediante CRISPR/Cas9.

[eng] The genomic edition based on the CRISPR/Cas9 system has become a central tool for studies of gene function in cellular models. Consequently, this methodology is also of great interest for the study of gene function in malignant glioma cells. To achieve an efficient genomic edition, it is important to generate cells with high levels of expression of the bacterial endonuclease Cas9, which implies in practice selecting Cas9 transfectants. Once Cas9+ cells are available, they can be transfected with specific sgRNAs for the genes of interest in order to modulate their expression. The general objective of this work is to generate a collection of Cas9+ human glioblastoma cell lines for future use in genomic editing studies using CRISPR/Cas9.