Estudio de la bioaccesibilidad y análisis de riesgo de contaminantes persistentes en suelos reciclados de caucho

Abstract

[spa] Se ha utilizado el método unificado de bioaccesibilidad (UBM), que es un tipo de digestión fisiológica in vitro, para la determinación de la bioaccessibilidad de hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs) en muestras de caucho reciclado de diferentes áreas recreativas de España y Portugal. Para el análisis de la fracción bioaccesible obtenida en este ensayo, se han comparado diferentes métodos de preparación de muestra, incluyendo precipitación con acetonitrilo, extracción en fase sólida (SPE) y saponificación con posterior SPE. De entre todos los métodos, la SPE resultó ser la más adecuada para esta aplicación. En condiciones óptimas, este método requiere añadir un 20% de metanol (v/v) a las muestras de jugo gastrointestinal obtenidas tras el procedimiento UBM, 30 mg de resina Oasis HLB Prime, extracción de 1 mL de muestra, elución con 1 mL de acetonitrilo:metanol 90:10 (v/v) y posterior concentración por evaporación y reconstitución. El método UBM-SPE en combinación con cromatografía de líquidos de alta resolución y detección fluorescente (HPLCFD) fue validado y aplicado para el análisis de la bioaccesibilidad de PAHs en las muestras reales estudiadas. Los resultados obtenidos indicaron bajas concentraciones de PAHs en la fracción bioaccesible (4.98·10–5 – 8.82·10–3 μg·kg–1). En ninguno de los casos, las concentraciones bioaccesibles encontradas superaron la dosis de referencia oral diaria de PAHs (la dosis máxima establecida es de 3·10–4 mg·kg·día–1 para B[a]P) indicada por el Sistema de Información Integrado de Riesgo de la Agencia de Protección Ambiental de USA (IRISEPA).

[eng] An in vitro physiological digestion, based on the unified bioaccessibility method (UBM) protocol, has been developed for polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) bioaccessibility determination in recycled tire crumbs from recreational areas from Spain and Portugal. The bioaccesible fraction analysis needed a sample preparation step. Three different sample preparation methods were compared, including: protein precipitation with acetonitrile, solid phase extraction (SPE) and saponification followed by SPE. The most adequate method for this application was SPE. In optimal conditions, the method required the addition of 20% of methanol (v/v) to the samples after the UBM protocol, 30 mg of Oasis HLB Prime sorbent, 1 mL of sample during SPE extraction, 1 mL of acetonitrile:methanol 90:10 (v/v) for the elution, and a posterior concentration by evaporation and reconstitution. The UBM-SPE method in combination with high performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FD) was validated and applied for assessing real sample bioaccessibilty. The results showed low PAHs concentrations in the bioaccessible fraction (4.98·10–5 – 8.82·10–3 μg·kg–1). In any case, these PAHs concentrations did not overcome the oral reference dose (the maximun dose established is 3·10–4 mg·kg·día–1 for B[a]P) defined by the Integrated Risk Information of the US Enviromental Protection Agency (IRIS-EPA).