Estudio y caracterización del secretoma de células de cáncer de mama expuestas a mediadores inflamatorios

Abstract

[spa] A lo largo de los años se ha relacionado el estado inflamatorio en el tejido mamario con las recidivas que padecen las pacientes que han sufrido un cáncer de mama. Se vincula la instauración de este estado tras la resección del tumor. Se tiene la hipótesis de que distintas proteínas inflamatorias serían parte responsable del cambio de identidad de las células normales hacia un fenotipo tumoral, el cual acabaría desarrollando la recidiva. En este estudio, se ha determinado la respuesta celular frente al tratamiento compuesto por 17ß-estradiol, TNFα e interlequina 6 (ETI) sobre la línea celular MDA-MB231, con el objetivo de analizar las proteínas que pueden ver incrementada su expresión tanto en las células tratadas, como en el secretoma producido por estas. Este secretoma da lugar a lo que se ha denominado medio condicionado, el cual será utilizado posteriormente para validar su efecto proinflamatorio en la migración celular de la línea MCF-7. Se ha observado como en las células tratadas existe una mayor activación de la proteína STAT3, y una expresión uniforme de NFkB, mientras que en el secretoma, se han detectado niveles de expresión muy incrementados de las citoquinas IL-6 e IL-8. Estos resultados son prometedores, ya que indican que el estado inflamatorio inducido por ETI se ha llevado a cabo correctamente. Además, en el ensayo Wound Healing se ha visto claramente como debido al tratamiento proporcionado (medio condicionado) las células de la línea MCF-7 incrementan su migración y modifican su morfología. De esta manera, se pone en relieve la importancia de estudiar los componentes del secretoma, para así poder identificar en un futuro nuevos biomarcadores o dianas de acción temprana frente a futuras recidivas de esta patología.

[cat] Al llarg dels anys s'ha relacionat l'estat inflamatori en el teixit mamari amb les recidives que pateixen les pacients que han sofert un càncer de mama. Es vincula la instauració d'aquest estat després de la resecció del tumor. Es té la hipòtesi que diferents proteïnes inflamatòries serien part responsable del canvi d'identitat de les cèl·lules normals cap a un fenotip tumoral, el qual acabaria desenvolupant la recidiva. En aquest estudi, s'ha determinat la resposta cel·lular davant del tractament compost per 17ß-estradiol, TNFα i interleucina 6 (ETI) sobre la línia cel·lular MDA-MB-231, amb l'objectiu d'analitzar les proteïnes que poden veure incrementada la seva expressió tant en les cèl·lules tractades com en el secretoma produït per aquestes. Aquest secretoma dóna lloc al que s'ha denominat medi condicionat, el qual serà utilitzat posteriorment per validar el seu efecte proinflamatori en la migració cel·lular de la línia MCF-7. S'ha observat com en les cèl·lules tractades existeix una major activació de la proteïna STAT3 i una expressió uniforme de NFkB, mentre que en el secretoma s'han detectat nivells d'expressió molt incrementats de les citoquines IL-6 i IL-8. Aquests resultats són prometedors, ja que indiquen que l'estat inflamatori induït per ETI s'ha dut a terme correctament. A més, en l'assaig Wound Healing s'ha vist clarament com a causa del tractament proporcionat (medi condicionat), les cèl·lules de la línia MCF-7 incrementen la seva migració i modifiquen la seva morfologia. D'aquesta manera, es posa en relleu la importància d'estudiar els components del secretoma per poder identificar en un futur nous biomarcadors o dianes d'acció primerenca enfront de futures recaigudes d'aquesta patologia.

[eng] Over the years, an inflammatory state in breast tissue has been associated with recurrences experienced by patients who have suffered from breast cancer. The establishment of this state is linked to the tumor resection. The hypothesis is that different inflammatory proteins would be partly responsible for the change in identity of normal cells towards a tumor phenotype, ultimately leading to recurrence. In this study, the cellular response to treatment composed of 17ß-estradiol, TNFα, and interleukin 6 (ETI) has been determined on the MDA-MB-231 cell line, with the aim of analyzing the proteins that may have increased expression both in the treated cells and in the secretome produced by them. This secretome gives rise to what has been called conditioned medium, which will be subsequently used to validate its proinflammatory effect on the cellular migration of the MCF-7 line. It has been observed that in the treated cells, there is a higher activation of the STAT3 protein and a uniform expression of NFkB, while in the secretome, significantly increased expression levels of the cytokines IL-6 and IL-8 have been detected. These results are promising as they indicate that the inflammatory state induced by ETI has been successfully carried out. Furthermore, in the Wound Healing assay, it has been clearly observed that due to the provided treatment (conditioned medium), the cells of the MCF-7 line increase their migration and modify their morphology. Thus, the importance of studying the components of the secretome is highlighted in order to identify new biomarkers or targets for early intervention against future recurrences of this pathology.