Patrón diferencial de isoformas de splicing de SMS1: evaluación en varias líneas tumorales y en respuesta a Minerval

Abstract

[spa] El cáncer es la segunda causa de muerte por enfermedad por detrás de las enfermedades cardiovasculares. Por ello, el estudio del cáncer es necesario en la sociedad actual. Dado que los tratamientos que existen hasta el momento no son eficaces, se ha abordado una nueva estrategia terapéutica: la Terapia Lipídica de Membrana (TLM), que se basa en la modificación de la estructura y composición de las membranas para modular procesos celulares como las cascadas de señalización. El agente antitumoral ácido 2- hidroxioleico (2OHOA) o Minerval, es un lípido de diseño que actúa mediante la TLM, alterando la disposición de receptores y enzimas que se encuentran en la membrana y alterando vías de señalización relacionadas con la proliferación y la muerte celular. Así, una de las funciones del 2OHOA es activar las esfingomielina sintasas (SMSs), enzimas responsables de catalizar de forma reversible la transformación de ceramida y fosfatidilcolina en esfingomielina (SM) y diacilglicerol. La activación de las SMSs produce un incremento de los niveles de SM, un lípido que, junto al colesterol, forma parte de unas importantes plataformas de señalización de la membrana plasmática, los lipid rafts, que se encuentra en altos niveles en el sistema nervioso central, y que en células tumorales se encuentra en niveles bajos. El incremento de la SM induce una reorganización de la membrana que permite la activación de receptores que llevan a la muerte celular por apoptosis o autofagia, o a una parada del ciclo celular. La principal enzima encargada de la síntesis de SM es la esfingomielina sintasa 1 (SMS1) que se localiza en el aparato de Golgi. En 2011 fue publicado en la revista Gene (Rozhkova et al.) que esta enzima cuenta con diferentes isoformas que difieren entre sí en su región 5’-UTR (untranslated region) o en las combinaciones de exones que las componen, y que además poseen patrones de expresión diferentes en los distintos tejidos humanos, lo que sugiere que existe una gran regulación en la expresión de esta proteína. El propósito de este trabajo es evaluar si las isoformas de splicing de SMS1 son relevantes en la susceptibilidad del glioblastoma y otros tumores sólidos (colon, pulmón y mama) al tratamiento con Minerval. Para tal objetivo se utilizaron distintas líneas celulares (glioblastoma –SF268, SNB19–, colon –SW620, HCT116–, pulmón –A549, NCI-H460–, y mama –MDA-MB-231–) en condiciones control y tratadas con Minerval, de las cuales se extrajo el ARN para posterior análisis mediante técnicas de PCR, electroforesis en gel de poliacrilamida y tinción con nitrato de plata. Como resultado, se describe en las líneas tumorales en comparación con el tejido sano la predominancia de isoformas que carecen de función catalítica y que son dominantes negativos de la isoforma completa. La relevancia de este hallazgo en respuesta a Minerval requerirá más investigación.