Síntesis de compuestos oligoescuaramídicoss y evaluación su interacción con ácidos nucleicos

Abstract

[eng] La transfección es una herramienta de gran utilidad en la terapia génica, consistente en la introducción de material genético en células objetivo. La transfección facilitada por moléculas orgánicas se presenta como alternativa a los procesos virales de terapia génica no siempre exentos de efectos no deseados. Los compuestos capaces de transfectar han de mostrar una interacción con el ADN positiva, compactando el ADN en forma de pequeños agregados y neutralizando la carga negativa de la cadena polifosfatada del mismo. En este aspecto, algunas oligoescuaramidas macrocíclicas han demostrado tener una capacidad de transfección capaz de competir con agentes de transfección comerciales y manteniendo una citotoxicidad baja. Estas moléculas formaban agregados de pequeño tamaño con el ADN que tenían potenciales Zeta positivos. Es en este contexto que se plantearon los objetivos que se llevaron a cabo en este trabajo. En primer lugar, la síntesis de moléculas oligoescuaramídicas macrocíclicas a las que se les trató de introducir grupos intercaladores fluorescentes que permitieran evaluar el impacto de dicha unidad en la capacidad de interacción con el ADN y permitir un fácil seguimiento de las moléculas en el interior celular. También se evaluó la interacción con el ADN de moléculas oligoescuaramídicas lineales y se comparó su capacidad de interacción con sus contrapartidas macrocíclicas. También se observó cómo afecta el aumento en la longitud de la cadena a dicha interacción. Para realizar este trabajo los compuestos sintetizados se sometieron a estudios de Microscopía de Fuerzas Atómicas (AFM), Dispersión de Luz Dinámica (DLS), Potencial Z, Valoración por Calorimetría Isoterma (ITC) y Espectroscopía de Fluorescencia. La finalidad de este trabajo es la de evaluar la posible aplicación como agentes de transfección de los compuestos evaluados, así como para obtener valores de constantes de asociación y los valores termodinámicos del proceso. Del mismo modo se pretende establecer una relación entre la estructura de los compuestos estudiados y su capacidad de interacción con el ADN.