Disección de la infección por Haemophilus influenzae no tipable: interacción con fagocitos profesionales y definición de un patrón molecular asociado a patogénesis

Abstract

[esp] Haemophilus influenzae no tipable (HiNT) es un patógeno oportunista que causa infecciones respiratorias agudas e infecciones crónicas en pacientes respiratorios crónicos que sufren enfermedades asociadas al tabaquismo. En esta Tesis Doctoral, hemos diseccionado la interacción de HiNT con el macrófago alveolar, principal fagocito residente del tracto respiratorio humano. Hemos analizado (i) la progresión de la infección de macrófagos en cultivo y ex vivo; (ii) la implicación del lipooligosacárido bacteriano en dicha infección; (iii) la modulación de la infección por exposición a humo de tabaco y a terapia corticoide. El macrófago alveolar elimina la infección por HiNT mediante procesamiento fagolisosomal. La exposición celular a humo de tabaco disminuye su capacidad fagocítica, al bloquear parcialmente la cascada de señalización dependiente de la quinasa PI3K. El corticoide no revierte el defecto causado por el humo de tabaco. En segundo lugar, hemos analizado la diversidad genética y fenotípica de dos colecciones de aislados clínicos de HiNT. Hemos determinado la distribución y conservación de secuencia de nueve genes que codifican moléculas localizadas en la superficie bacteriana. Hemos establecido un patrón génico prevalente, parcialmente asociado a la resistencia del patógeno a la muerte mediada por complemento y a su adhesión al epitelio respiratorio humano.

[eng] Nontypable Haemophilus influenzae (NTHi) is an opportunistic pathogen that causes acute infections and chronic infections in patients suffering chronic respiratory diseases associated to tobacco smoking. We characterized NTHi infection of alveolar macrophages, the main resident professional phagocyte in the human respiratory tract. We studied (i) the progression of the infection by using both in vitro and ex vivo approaches; (ii) the involvement of bacterial lipooligosaccharide in macrophage infection; (iii) the effect of host cell exposure to cigarette smoke and corticoids on bacterial infection. Alveolar macrophages clear NTHi infection by phagolysosomal maturation. Host cell exposure to cigarette smoke impairs bacterial phagocytosis. Mechanistically, this impairment may be due to a partial inhibition of PI3K signaling by cigarette smoke, which is not reverted by cell treatment with corticoids. Moreover, we analyzed NTHi genetic and phenotypic diversity in two collections of clinical isolates, by assessing the distribution and sequence conservation of nine genes encoding bacterial surface molecules. We determined the existence of a prevalent gene pattern, which could be associated to bacterial resistance to complement mediated killing and to NTHi adhesion to the human respiratory epithelium.