Caracterización de la función de la proteína PATJ en neurófilos

Abstract

[spa] El accidente cerebrovascular, o ictus, constituye una de las principales causas de discapacidad en el adulto. El descubrimiento – a partir de muestras de glóbulos blancos humanos – del gen PATJ como un gen asociado al pronóstico funcional del ictus, abre una línea de investigación centrada en PATJ como diana terapéutica. El estudio de diferentes variantes de baja frecuencia del gen PATJ identificó al SNP rs76221407 como la variante que presentaba una relación más estrecha con un peor pronóstico funcional del ictus. La función de PATJ en las células leucocitarias es desconocida, por lo que su elucidación fue uno de los objetivos primordiales de este trabajo. Primero, los análisis de RT-PCR realizados sobre muestras de pacientes sanos revelaron que los neutrófilos son las células mieloides que expresan más el gen PATJ. En base a esto, se efectuó el análisis de la expresión de PATJ en neutrófilos extraídos a partir de pacientes con buen y mal pronóstico funcional, medido con la Escala Rankin Modificada (mRS) tras haber sufrido un ictus. Los resultados obtenidos demostraron que PATJ se infra-expresa tras el ictus, siendo mayor su infra-expresión en aquellos pacientes con buen pronóstico. Finalmente, se realizó un último ensayo de RT-PCR para evaluar el efecto de la variante rs76221407 sobre la expresión de PATJ en pacientes sanos. Los pacientes heterocigotos para dicha variante expresaban más PATJ que los homocigotos para el alelo salvaje. Por ende, los datos aquí presentados demuestran que la desregulación de PATJ es esencial para obtener una mejor recuperación tras el ictus.

[eng] Stroke is one of the main causes of disability in adults. The discovery – from samples of human white blood cells – of the PATJ gene as a gene associated with the functional outcome of stroke opens a line of research focused on PATJ as a therapeutic target. The study of different low frequency variants of the PATJ gene identified the SNP rs76221407 as the variant that had a close association with a worse functional outcome of stroke. The role of PATJ in leukocyte cells is unknown, so its elucidation was one of the primary objectives of this project. First, RT-PCR analysis performed on samples from healthy patients revealed that neutrophils are the myeloid cells that express the PATJ gene the most. Based on this, analysis of the expression of PATJ was carried out in neutrophils extracted from patients with good and bad functional outcome, measured with the Modified Rankin Scale (mRS) after having suffered a stroke. The results obtained showed that PATJ is downregulated after the stroke, and its downregulation is higher in those patients with a good outcome. Finally, a final RT-PCR assay was performed to evaluate the effect of the rs76221407 variant on the expression of PATJ in healthy patients. Heterozygous patients for this variant expressed more PATJ than homozygotes for the wild-type allele. Therefore, the data presented here demonstrate that the deregulation of PATJ is essential to obtain a better recovery after a stroke.