Noble Pen shell parasite Haplosporidium pinnae: parasite detection in environmental samples through the technique PCR

Abstract

[eng] Pinna nobilis Linnaeus, 1758, is an endemic marine mussel of the Mediterranean Sea. Since 2016, the population of P. nobilis has decreased between 80-100% mainly associated to the parasite Haplosporidium pinnae. This new pathogen H. pinnae induces the death of the pen shell obstructing its digestive gland. Since 2018, Pinna nobilis is listed as in critical situation and priority preference by the Spanish government (Orden TEC/1708/2018), and this is due to its important role in the Mediterranean ecosystem, contributing to water transparency, and the pressure which it has been subjected this last years. The aim of this study is to contribute to create a protocol for parasite detection in seawater and planktonic samples, which have been collected in different locations of the Mediterranean Sea, in any of its life stages: free-living, spores, intermediate host… in order to increase the knowledge about its life cycle and intermediate hosts, essential to enhance the early detection and improve survival possibilities of Pinna nobilis. The detection of the parasite has been made through a genetic study of the seawater and planktonic samples using the well-known technique PCR and specific primers designed in previous studies for this parasite. Haplosporidium pinnae was finally detected on planktonic samples being this the first study providing this parasite detection outside its main host.

[eng] Pinna nobilis Linnaeus, 1758, es una especie de molusco marino endémica del Mar Mediterráneo. Desde 2016, P. nobilis ha visto disminuida su población entre un 80-100%, este descenso se ha asociado principalmente a la aparición de un parásito llamado Haplosporidium pinnae. Desde 2018, Pinna nobilis está catalogada en peligro crítico y se le ha otorgado prioridad preferente por el Gobierno de España (Orden TEC/1708/2018), debido a su importante rol dentro del Mar Mediterráneo contribuyendo a la transparencia del agua y la presión a la que se ha visto sometida estos últimos años. El objetivo de este estudio contribuir a la creación de un protocolo que permita detectar el parásito en muestras de agua y plancton, las cuales han sido recogidas en diferentes puntos del Mar Mediterráneo, en cualquiera de sus formas de vida: vida libre, esporas, hospedadores intermediarios, para mejorar el conocimiento sobre el ciclo de vida de esta especie y sus posibles hospedadores intermediarios con la finalidad de conseguir una rápida detección del parásito y así aumentar las posibilidades de supervivencia de la especie P. nobilis. La detección del parásito se ha realizado mediante un estudio genético de las muestras de agua y plancton utilizando la conocida técnica de la PCR y primers específicos diseñados en estudios previos para detectar este parásito. Haplosporidium pinnae fue detectado en muestras de plancton, convirtiendo a este estudio en el primero en probar la presencia del parásito fuera de su hospedador intermediario.