Posada a punt d'un protocol molecular per a l'amplificació del genoma mitocondrial complet de Parasteropleurus balearicus, una espècie d'ortòpter endèmica de les Balears

Abstract

[cat] Parasteropleurus és un gènere d’ortòpters de la família dels tetigònids (Tettigoniidae) i que pertany a la subfamília dels bradiporins (Bradyporinae), coneguts com a grills de matoll o someretes. Actualment el gènere està format per 8 espècies, 3 de les quals presenten una distribució Ibero-Balear. L'espècie P. balearicus va ser descrita per Bolívar l’any 1884 i és endèmica de les Illes Balears on només es troba a les illes de Mallorca i Menorca. Actualment no es disposa d’informació genètica en relació a aquest gènere d'ortòpters per la qual cosa el present treball de fi de grau es centra en posar a punt un mètode molecular per a l'amplificació del genoma mitocondrial complet d’aquest endemisme balear. Amb aquest objectiu, s’han dut a terme diferents metodologies així com l’amplificació del mitogenoma de varis fragments d’ADN mitjançant PCR d’ampli rang a partir d’un exemplar trobat al Cap de Ses Salines de Mallorca. Disposar de recursos de les espècies ens proporciona una eina molt valuosa per al seu coneixement i també per la seva conservació, sobretot per aquelles que estan en perill o són vulnerables com és P. balearicus. L'ADN mitocondrial ha estat àmpliament utilitzat com a marcador molecular degut a les seves característiques que faciliten la tipificació molecular d'individus. Amb l’utilització d’encebadors universals dels gens cox1, cytB, 16S i 12s, i posterior disseny de nous encebadors per a PCR llarga a partir d’aquests marcadors, es va complir l’objectiu d’amplificar amb èxit el mitogenoma de l’insecte. Complir aquest propòsit ens ha permès seguir indagant més en la investigació de cara a seqüenciar el genoma mitocondrial d’aquesta espècie.

[eng] Parasteropleurus is a genus of Orthoptera in the family Tettigoniidae that belongs to the subfamily Bradyporinae, commonly known as bush crickets. The genus includes 8 recognized species, 3 of which show an Ibero-Balearic distribution. The species P. balearicus was first described by Bolívar in 1884 and is endemic to the Balearic Islands where it is only found on the islands of Mallorca and Menorca. No genetic information is currently available regarding this genus of orthopterans, so the present final degree projectf focuses on setting up a molecular method for the amplification of the complete mitochondrial genome of this Balearic endemism. In order generate a complete sequence of this species, different methodologies have been implemented including the amplification of the mitogenome in two DNA fragments by wide- ranging PCR of a specimen found in Cap de Ses Salines in Mallorca. The availability of genetic resources from the species provides us with a very valuable tool to improve our knowledge and also to promote conservation, especially for those that are endangered or vulnerable such as P. balearicus. Mitochondrial DNA has been widely used as a molecular marker due to its characteristics that facilitate the molecular typing of organisms. We could amplify the mitogenome of P. balearicus through sequencing of the genes cox1, cytB, 16S and 12s based on universal primers, followed by the design of species-specific long-range PCR primers. Fulfilling this purpose has allowed us to continue to investigate further in the research in order to sequence the mitochondrial genome of this specie.