Caracterización de la fibrosis pulmonar en ratones nude para el desarrollo de un nuevo modelo de estudio de la fibrosis pulmonar idiopática

Abstract

[spa] La fibrosis pulmonar idiopática (FPI) es una patología caracterizada por la acumulación progresiva de matriz extracelular para la que no hay tratamiento curativo. Los ratones Swiss CD1-nude presentan inmunodeficiencia que los hace ideales para ensayos preclínicos para investigar el efecto de células humanas. El objetivo es caracterizar el modelo de FPI animal de ratones Swiss CD1-nude hembra de dosis repetidas de bleomicina (6 U/kg) simplificado (3 dosis) frente al modelo convencional de dosis única. Se realiza una valoración macroscópica de los lóbulos pulmonares, una cuantificación de cortes histológicos teñidos con hematoxilina-eosina, caracterización celular del lavado broncoalveolar (BAL) por citometría de flujo, análisis de la expresión génica por qPCR y Western blot. El modelo de dosis repetidas muestra una mayor proporción de leucocitos, y concretamente células mieloides en el BAL, los pulmones presentan más signos de fibrosis que la dosis única a nivel tisular. No hay variaciones significativas en la expresión del ARNm de genes involucrados en la biogénesis y función mitocondrial, la mitofagia, la inflamación o proteínas componentes de la matriz extracelular. Se concluye que los ratones Swiss CD1 presentan cierta resistencia a la bleomicina y que se deben analizar otros parámetros clave para valorar la FP para así valorar la necesidad de perfeccionar el modelo.

[eng] Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a pathology characterized by the progressive accumulation of extracellular matrix for which there is no curative treatment. Swiss CD1-nude mice show immunodeficiency which makes them ideal for preclinical tests to investigate the effect of human cells. The objective is to characterize the animal IPF model of female Swiss CD1-nude mice with repeated doses of bleomycin (6 U / kg). simplified (3 doses) versus the conventional single dose model. A macroscopic evaluation of the pulmonary lobes, a quantification of histological sections stained with hematoxylin-eosin, cellular characterization of the bronchoalveolar lavage (BAL) by flow cytometry, analysis of gene expression by qPCR and Western blot is performed. The repeated dose model shows a higher proportion of leukocytes, and specifically myeloid cells in the BAL, the lungs show more signs of fibrosis than the single dose at the tissue level. There are no significant variations in the expression of the mRNA of genes involved in mitochondrial biogenesis and function, mitophagy, inflammation or component proteins of the extracellular matrix. It is concluded that Swiss CD1 mice have some resistance to bleomycin and that other key parameters should be analyzed to assess FP in order to assess the need to refine the model.