[spa] El actual incremento de casos de infección por Pseudomonas aeruginosa resistente a los
antibióticos es un problema clínico-epidemiológico que reduce progresivamente nuestro
arsenal terapéutico útil. Por este motivo, son muchos los esfuerzos para encontrar nuevas
dianas terapéuticas para diseñar fármacos anti-pseudomónicos eficaces, de carácter
clásico o incluso algunos más innovadores, como las denominadas terapias antivirulencia. Éstas están orientadas a debilitar la patogenia de la bacteria, haciendo las
consecuencias clínicas mucho menos graves para el paciente e incrementando las
posibilidades de eliminación por parte del sistema inmune. En el presente trabajo se
pretendió evaluar una diana con potencial aplicación en este contexto, pues por
resultados preliminares, se hipotetizó que la ligasa citosólica Mpl de P. aeruginosa,
implicada en el reciclaje de la pared celular y en la resistencia a β-lactámicos, podría ser
causante de un drástico incremento en la sensibilidad a la lisozima del hospedador. En tal
caso, Mpl quedaría habilitada como una diana perfecta para ser atacada por futuros
fármacos que debilitarían a la bacteria frente a la lisozima del paciente, promoviendo el
aclaramiento de la infección. Por ello, en este trabajo se ha llevado a cabo la inactivación
del gen mpl en P. aeruginosa mediante doble recombinación alélica, para poder analizar
el fenotipo del mutante obtenido en cuanto a su perfil de resistencia a los β–lactámicos y a
la lisozima. Si bien es cierto que los resultados finales no han permitido ligar el noqueo de
mpl con un aumento de sensibilidad a la lisozima, este trabajo supone un manual
exhaustivo acerca del proceso de inactivación génica en P. aeruginosa, que incluye
detalladamente multitud de técnicas de biología molecular y microbiología clásica, así
como las soluciones para solventar los problemas experimentales que han ido surgiendo a lo largo del proceso de noqueo génico.