[spa] El ictus es una enfermedad cerebrovascular que se produce debido a una rotura u
obstrucción en los vasos sanguíneos, reduciendo el flujo de sangre al cerebro. En la
actualidad, el ictus es la segunda causa de muerte en el mundo y el número continúa
creciendo debido al aumento de la población y el envejecimiento. Como consecuencia
de la lesión isquémica se induce la respuesta inflamatoria, siendo los neutrófilos los
primeros leucocitos infiltrantes. Debido a la elevada prevalencia del ictus isquémico, se
han estudiado genes y moléculas implicadas en la recuperación de la lesión isquémica.
PATJ es uno de los genes identificados en los neutrófilos, cuya infra-expresión se
relaciona con un peor pronóstico funcional. Con la finalidad de estudiar la potencial
relación entre la proteína PATJ y los procesos de migración, adhesión e infiltración en
los neutrófilos, se generaron cultivos celulares de neutrófilos primarios y se manipuló la
expresión del gen PATJ mediante transfección de RNA de interferencia anti-PATJ. Los
niveles de expresión de PATJ se analizaron por RT-PCR y los estudios funcionales de
transmigración a través de células endoteliales se realizaron utilizando cámaras de
boyden seguido de contaje por citometría de flujo. Los resultados sugieren que los
neutrófilos que infra-expresan PATJ presentan mayores tasas de adherencia e
infiltración. Además, se estudió la expresión de PATJ en respuesta a diferentes
estímulos quimioatrayentes como C-GSF o IL-8, medida por WB. Los resultados
demostraron PATJ se modula en respuesta a estímulos quimioatrayentes, y que dicha
modulación sigue un patrón similar al de proteínas constituyentes del citoesqueleto de
actina, tales cómo b-actina o a-smooth actina. Nuestros resultados sugieren que PATJ
en los neutrófilos regula procesos como la migración, adherencia e infiltración, mediante
la modulación del citoesqueleto de actina.
[cat] L'ictus és una malaltia cerebrovascular que es produeix a causa d'un trencament o
obstrucció dels vasos sanguinis, reduint el flux de sang al cervell. Actualment, l'ictus és
la segona causa de mort al món i el nombre continua creixent a causa de l'augment de
la població i l'envelliment. Com a conseqüència de la lesió isquèmica s'indueix la
resposta inflamatòria, sent els neutròfils els primers leucòcits infiltrants. A causa de
l'elevada prevalença de l'ictus isquèmic, s'han estudiat gens i molècules implicades a la
recuperació de la lesió isquèmica. PATJ és un dels gens identificats en els neutròfils, la
infraexpressió dels quals es relaciona amb un pitjor pronòstic funcional. Amb la finalitat
d'estudiar la relació potencial entre la proteïna PATJ i els processos de migració, adhesió
i infiltració als neutròfils, es van generar cultius cel·lulars de neutròfils primaris i es va
manipular l'expressió del gen PATJ mitjançant transfecció d'RNA d'interferència anti PATJ. Els nivells d'expressió de PATJ es van analitzar per RT-PCR i els estudis
funcionals de transmigració a través de cèl·lules endotelials es van fer utilitzant càmeres
de Boyden seguit de comptatge per citometria de flux. Els resultats suggereixen que els
neutròfils que infraexpressen PATJ presenten majors taxes d'adherència i infiltració. A
més, es va estudiar l'expressió de PATJ en resposta a diferents estímuls quimioatrayents
com ara C-GSF o IL-8, mesurada per WB. Els resultats van demostrar que PATJ es
modula en resposta a estímuls quimioatrayents, i que aquesta modulació segueix un
patró similar al de proteïnes constituents del citoesquelet d'actina, com ara b-actina o a smooth actina. Els nostres resultats suggereixen que PATJ als neutròfils regula
processos com la migració, adherència i infiltració, mitjançant la modulació del
citoesquelet d'actina
[eng] Stroke is a cerebrovascular disease that occurs due to a rupture or obstruction in the
blood vessels, reducing blood flow to the brain. Stroke is currently the second leading
cause of death in the world and its incidence keeps increasing due to population growth
and aging. Because of the ischemic injury, the inflammatory response is induced, with
neutrophils being the first infiltrating leukocytes. Due to the high prevalence of ischemic
stroke, genes and molecules involved in recovery from ischemic injury have been studied.
PATJ is one of the genes identified in neutrophils, whose under-expression is related to
a worse functional prognosis. To study the potential relationship between the PATJ
protein and the processes of migration, adhesion and infiltration in neutrophils, cell
cultures of primary neutrophils were generated and the expression of the PATJ gene was
manipulated by transfection of anti-PATJ interfering RNA. PATJ expression levels were
measured by RT-PCR and functional studies of transmigration through endothelial cells
were performed using Boyden chambers followed by flow cytometric counting. The
results suggest that neutrophils that under-express PATJ have higher rates of adherence
and infiltration. In addition, the expression of PATJ in response to different
chemoattractant stimuli such as C-GSF or IL-8, measured by WB, was also studied. The
results showed that PATJ is modulated in response to chemoattractant stimuli, and that
this modulation follows a pattern similar to that of constituent proteins of the actin
cytoskeleton, such as b-actin or a-smooth actin. Our results suggest that PATJ in
neutrophils regulates processes such as migration, adhesion and infiltration, by
modulating the actin cytoskeleton.