Implementación de modelos in vitro de calcificación patológica de células de la musculatura lisa vascular (VSMC)

Abstract

[spa] La calcificación medial (CM) es una de las dos principales calcificaciones vasculares, en la cual la capa media de los vasos sanguíneos calcifica y provoca importantes cambios hemodinámicos asociados a complicaciones cardiovasculares. La CM carece de fármacos aprobados capaces de revertirla y las estrategias terapéuticas actuales tan solo tratan frenarla, con importantes efectos secundarios. Las células del músculo liso vascular (VSMC) son la principal población celular residente de la capa media de los vasos sanguíneos y jugarían un papel clave en la CM. Para el testeo y mejora de fármacos y estrategias contra la CM, es imperativa la obtención de modelos in vitro de la CM. El presente trabajo tiene como objetivo la optimización de una serie de posibles modelos experimentales de la calcificación patológica en cultivos celulares in vitro. Para ello, se llevaron a cabo varios protocolos de extracción celular para cultivo primario, se testearon en VSMC de rata y de humano varios protocolos de calcificación de las células e inducción a la transdiferenciación osteogénica, se cuantificó la calcificación y se analizó la expresión génica, con el objetivo de encontrar el modelo más adecuado para el estudio de la CM patológica.

[cat] La calcificació medial (CM) és una de les dues principals calcificacions vasculars, en la qual la capa mitjana dels vasos sanguinis calcifica i provoca importants canvis hemodinàmics associats a complicacions cardiovasculars. La CM no té fàrmacs aprovats capaços de revertir-la i les estratègies terapèutiques actuals tan sols tracten de frenar-la, amb importants efectes secundaris. Les cèl·lules del múscul llis vascular (VSMC) són la principal població cel·lular resident de la capa mitjana dels vasos sanguinis i jugarien un paper clau a la CM. Per al testeig i la millora de fàrmacs i estratègies contra la CM, és imperativa l'obtenció de models in vitro de la CM. Aquest treball té com a objectiu optimitzar una sèrie de possibles models experimentals de la calcificació patològica en cultius cel·lulars in vitro. Per fer-ho, es van dur a terme diversos protocols d'extracció cel·lular per a cultiu primari, es van testejar a VSMC de rata i humanes diversos protocols de calcificació cel·lular i inducció a la transdiferenciació osteogènica, es va quantificar la calcificació i es va analitzar l'expressió gènica, amb l’objectiu de trobar el model més adequat per a l'estudi de la CM patològica.

[eng] Medial calcification (MC) is one of the two main vascular calcifications, in which the middle layer of blood vessels calcifies and causes important hemodynamic changes associated with cardiovascular complications. MC lacks approved drugs capable of reversing it and current therapeutic strategies only try to slow the progression down, with significant side effects. Vascular smooth muscle cells (VSMC) are the main resident cell population of the middle layer of blood vessels and would play a key role in MC. For the testing and improvement of drugs and strategies against MC, obtaining in vitro models of MC is imperative. The objective of this study is the optimization of a series of possible experimental models of pathological calcification in in vitro cell cultures. To this end, several cell extraction protocols for primary culture were carried out, several protocols for cell calcification and induction of osteogenic transdifferentiation were tested in rat and human VSMC, the calcification was quantified and gene expression was analyzed, with the aim of finding the most appropriate model for the study of pathological CM.