Identificació dels gens regulats pel microARN miR-3609, associat a pronòstic funcional de l’ictus isquèmic d’etiologia criptogènica

Abstract

[cat] L'ictus és la segona causa principal de discapacitat i mort arreu del món, amb una incidència creixent a causa del canvi demogràfic i l'augment de les malalties cardiovasculars. Recentment, s'ha identificat que el miR-3609 està associat amb un pronòstic funcional favorable en l’ictus isquèmic d’etiologia criptogènica. L'objectiu principal d’aquest treball de fi de màster ha estat identificar els gens diana regulats per aquest miRNA. Per aconseguir-ho, s’han realitzat estudis de transfecció gènica emprant molècules sintètiques mimètiques i inhibidores del miR-3609 endogen en cèl·lules endotelials microvasculars cerebrals humanes immortalitzades (hCMEC/d3). Posteriorment, s’ha estudiat el perfil d’expressió gènica mitjançant l’anàlisi de l’ARNm i de la proteïna en condicions de normòxia i hipòxia. Els resultats assenyalen el gen CRYAB, que codifica per la xaperona αB-cristal·lina, com a gen diana del miR-3609. Aquesta proteïna podria actuar en resposta a la hipòxia per induir un estat proinflamatori en les cèl·lules endotelials cerebrals. A més, s’ha observat que el miR-3609 regula CRYAB, inhibint la seva expressió en condicions d’hipòxia prolongada. Això suggereix que el miR-3609 podria ser una diana terapèutica en el futur per millorar el pronòstic funcional de pacients joves que hagin patit un ictus d’etiologia criptogènica

[eng] Stroke is the second leading cause of disability and death worldwide, with a growing incidence due to demographic changes and the increase in cardiovascular diseases. Recently, miR-3609 has been identified as being associated with a favorable functional prognosis in cryptogenic ischemic stroke. The main objective of this master's thesis was to identify the target genes regulated by this miRNA. To achieve this, transfection experiments to introduce synthetic mimetic and inhibitory molecules of endogenous miR3609 into immortalized human brain microvascular endothelial cells (hCMEC/d3) were performed. Subsequently, the gene expression profile was studied through mRNA and protein analysis under normoxic and hypoxic conditions. The results indicate that CRYAB gene, which encodes the αB-crystallin chaperone, is a target gene of miR-3609. This protein may respond to hypoxia by inducing a pro-inflammatory state in brain endothelial cells. Additionally, miR-3609 was observed to regulate CRYAB by inhibiting its expression under prolonged hypoxic conditions. This suggests that miR-3609 could be a therapeutic target in the future to improve the functional prognosis of young patients who have suffered a cryptogenic stroke