Caracterización de la unión de ceruloplasmina a Pseudomonas aeruginosa

Abstract

[spa] La ceruloplasmina es una proteína plasmática encargada de la homeostasis del cobre y del hierro. Es una proteína de la fase aguda que aumenta ante inflamación, infección o daño tisular, la cual se ha identificado como biomarcador de multitud de patologías. Se le atribuyen diferentes funciones entre las cuales destacamos un estudio que considera una posible función antibacteriana. En estudios serómicos anteriores realizados en nuestro laboratorio se observó unión entre la ceruloplasmina y Pseudomonas aeruginosa. Por ello, en este estudio quisimos caracterizar la unión y localizar su posible ligando, utilizando ceruloplasmina purificada y ceruloplasmina sérica procedente de suero. Pudimos observar que la unión se produce de manera general en todas las cepas de P. aeruginosa, destacando aquellas cepas crónicas adaptadas con una deleción del antígeno O. Para confirmar que la unión es más ventajosa en cepas que carecen de antígeno O, se analizó la unión a la cepa PAO1 y un mutante isogénico del LPS, PAO1ΔgalU, tanto a las células como a sus LPS. No se observaron diferencias en cuanto a la unión de los LPS purificados, pero se produjo una mayor unión al mutante PAO1ΔgalU. Para localizar el posible ligando se realizaron experimentos con PAO1 y un mutante de la porina de cobre OprC, PAO1ΔoprC, la cual resultó no ser el ligando, y experimentos selectivos con bolas magnéticas, los cuales necesitan una optimización del protocolo.